科瑞斯生物—流式荧光染料分类【烟台科瑞斯】流式荧光染料(下)

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发布时间: 2022/12/9 16:12:43
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关 键 词: 藻红蛋白,别藻蓝蛋白,交联别藻蓝蛋白,荧光蛋白
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科瑞斯生物—流式荧光染料分类【烟台科瑞斯】流式荧光染料(下)五、 重金属离子适用于质谱流式分析,不是用荧光素结合的,而是与镧系元素系列中的单个同位素重金属离子结合。目前商业上有35种镧系金属可用于抗体偶联。六、 串联染料串联染料是利用Forster共振能量转移(称为FRET或荧光共振能量转移)原理的特殊类别的荧光分子。串联染料(或荧光团)由两个共价连接的荧光分子组成。一个用作供体分子,而另一个用作受体。这产生了具有供体分子的激发和受体的发射性质的荧光团。特点:串联染料非常亮,具有较大的斯托克斯位移值(150-300 nm),检测低密度的抗原时非常有用。串联染料的稳定性不如供体荧光染料,并且能量转移效率因批次而异,使补偿复杂化。注:串联染料非常敏感和容易降解。这导致受体发射光损失和供体发射光增强,特别是如果荧光团使用相同激光器激发。例如,如果使用PE和PE-Cy7,并且PE-Cy7荧光团开始降解,则其发射的光将在PE通道中检测到,从而给导致错误的数据。串联染料降解的主要原因之一(除了氧自由基)是暴露于光–这是完全可预防的!所以,当染色细胞时,避免曝光或处于极端的温度变化环境。后一种建议的原因是某些串联染料可能易受细胞介导的解耦影响,因此在低温下减慢细胞代谢可有助于保持稳定性。七、 核酸染料核酸染料DAPI可嵌入到DNA双螺旋中。核酸荧光染料对细胞核染色后定量测量细胞所发出的荧光强度,就可以确定细胞核中DNA、RNA的含量,并可以对细胞周期(如PI,7-AAD, Dyelycle Violet, DAPI)和细胞的增殖状况进行分析,分选染色体(如Hoescht 33342,Chromomycin A3),利用侧群分析对干细胞进行分选(如Hoescht 33342),死活细胞区分以及对细菌进行分选。。有多种荧光染料可以对细胞中的DNA或RNA染色,常用的DNA染料包括碘化丙啶(PI)、DAPI、Hoechst 33342等,RNA染料有噻唑橙、叶啶橙等。八、 细胞增殖染料用BrdU((溴脱氧尿咤啶核苷)孵育细胞,使其掺入细胞DNA合成过程,然后用针对BrdU的抗体和DNA染料染色,便可测量细胞增殖。但是,此方法不适合长期增殖研究。羧基荧光素琥珀酰亚胺酯(CFSE)可用于跟踪增殖细胞的多次分裂。在合适的浓度下,不影响细胞生长或形态,适合长期增殖研究。九、 细胞死活染料细胞活力可以通过排除性染料(如碘化丙啶、DAPI)确定,染料不能固定,仅适用于无感染性且需立即分析的细胞。也可通过染料与细胞内胺类物质的结合检测,胺类染料包括Live/Dead (ThermoFisher),Zombie (Biolegend)或Fixable Viablity (BD Biosciences),适用于固定的细胞,适合有传染性细胞、胞内抗原染色的细胞、多聚甲醛固定的细胞。十、 钙指示剂染料钙指示剂染料与钙结合后会发生色移,可用于指示细胞和信号传导。常用的染料仍然是indo-1,即紫外双相钙探针。另外还有fluo-3的Blue-green calcium probes。【联系方式】座机:0535-3800305手机:17362126717地址:山东省烟台市高新区科技大道39号邮箱:liuchuany网站:
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