电泳和转膜
1. 取15ul样品/孔上样17%配体胶。
2. 按照制造商的说明进行SDS-PAGE。
3. 按照制造商的说明将凝胶蛋白转到PVDF或硝化纤l维素膜。
免l疫印迹反应和检测（所有步骤都是在室温下进行，Rac1 kit，并不断搅拌）
1. 将PVDF膜浸入100%甲l醇15s，然后在室温放置5 min晾干。
注意：如果使用的是硝化纤l维素膜，此步省略。
2. 封闭：用TBST缓冲液配制5%的脱脂牛奶或者3%BSA在室温下孵育1H进行封闭，并需要恒定振荡。
3. 孵育一抗：用TBST缓冲液配制的5%脱脂牛奶或3%BSA稀释特异性识别Cdc42活性构象的兔多克l隆抗l体（稀释比例为1:50-1:1000，主要根据样品中含有的Cdc42蛋白的量），室温下孵育1-2小时，或者4°C条件下过夜孵育。
4. 用TBST缓冲液洗涤膜三次/5min。
5. 孵育二抗：（例如羊抗兔IgG-HRP），用TBST缓冲液配制的5%脱脂牛奶或3%BSA按1:1000稀释比例稀释后使用，室温下孵育1小时并恒定振荡。
6. 用TBST缓冲液洗涤膜三次/5min。
7. 使用实验者所选择的检测方法进行显色如ECL显色法。
Gα13活化试验。MEF细胞分别用LPA（第2道）或不加LPA（1道）处理。细胞裂解物用抗活性Gα13单克l隆抗l体（Cat）孵育。#26902）（顶面板）。这个用抗Gα13兔多克l隆抗l体（Cat）免l疫印迹法检测沉淀活性Gα13#21005年）。底部的面板显示了用抗Gα13的细胞裂解物的Western blot（5%在顶部面板中使用的）。
武汉纽斯特生物科技有限公司（WuhanNewEastBiotechonologyCo.Ltd），系美国生命科学试剂供应商美国NewEastBio在中国的子公司。公司位于武汉东湖高新技术开发区光谷生物城.美国NewEastBio专注于生命科学和生物技术领域，主要产品有小分子、ELISA试剂盒、蛋白等，与世界高校和研究所、世界大制药公司、生物科技公司和医院等客户建立了长期稳定的合作关系，产品销往各地。
产品描述
ARF6（ADP-核糖基化因子6）是ARF超家族的成员。 ARF基因编码小的GTPases，它们会增加霍l乱毒l素的ADP-核糖基转移酶活性，并且对于作为磷脂酶D的激l活剂的囊泡运输至关重要。Alf6调节膜运输并起吞噬作用的调节分子的作用。
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