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发 布 地: 湖北省
发布时间: 2019-10-14 16:52:38
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关 键 词: ELISA试剂盒,生化试剂等
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比色

比色前应先用洁净的吸水纸拭干板底附着的液体,但应尽量避免刮花表面,然后将板正确放入酶标比色仪的比色架中。以软板为载体的试验,需先将板置于标准96孔的座架中,才可进行比色。好在加底物液显色前,先将软板边缘剪净,这样,elisa试剂盒,此板就可完全平妥坐入座架中。

比色时应先以蒸馏水校零点,测读底物孔(未经任何反应仅加底物液的孔)和空白孔(以生理盐水或稀释液代替标本作全过程的孔),以记录本次试验的试剂状况。其后可用空白孔以蒸馏水校零点,以上各孔的吸光度需减去空白孔的吸光度,然后进行计算。

比色结果的表达以往通用光密度(oplical density,elisa试剂盒厂家,OD),现按规定用吸光度(absorbence,A),两者含义相同。通常的表示方法是,将吸收波长写于A字母的右下角,如OPD的吸收波长为492nm,表示方法为'A492nm'或'OD492nm'。




酶标比色仪简称酶1标仪,通常指专用于测读ELISA结果吸光度的光度计。针对固相载体形式的不同,各有特1制的适用于板、珠和小试管的设计。许多试剂公司配套供应酶标1仪。酶标1仪的主要性能指标有:测读速度、读数的准确性、重复性、精1确度和可测范围、线性等等。优良的酶标1仪的读数一般可精1确到0.0 01,准确性为±1%,重复性达0.5%。举例说,若某孔测得的A值为1.083,则该孔相对于空气的真实A值应为1.083± 0.01(1.073~1.093),elisa试剂盒价格,重复测定数次,其A值均应1.083±0.05(1.078~1.088)在之间。酶1标仪的可测范围视各酶标1仪的性能而不同。普通的酶标1仪在0.000~2.000,新型号的酶标1仪上限拓宽达2.900,甚至更高。超出可测上限的A值常以'*'或'over'或其它符号表示。应注意可测范围与线性范围的不同,线性范围常小于可测范围,比如某一酶标1仪的可测范围为0.000~2.900,而其线性范围仅0.000~2.000,这在定量ELISA中制作标准曲线时应予注意。




一、ELISA实验通用规则

  1、要保证移液枪的准确性,误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但最1好有专业人员进行矫正。

  2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后,要更换枪头。即使是吸取标准品时。

  3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,elisa 试剂盒,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。

  4、实验时,要使底物避光保存。

  5、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。

  6、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。

  7、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。

  8、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶1标仪的晃动功能。

  9、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。

  10、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加彻底。没有洗板1机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。

  11、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。

  12、底物是光敏感的,要在临用前现配。


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